重组原核质粒GST-hTudor-SN-SN(1～4)的构建及表达

摘要：

目的 将人类Tudor-SN(tudor staphylococcal nuelease)蛋白SN(1～4)基因片段分别定向连入pGEX-4T-1质粒,使Tudor-SN蛋白sN各功能片段与(;"蛋白在大肠埃希菌BL21细胞内融合表达.方法 以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的 基因,利用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切法将目的 片段连接纠pGEX-4T-1载体卜,再将构建成功的GST-hTudor-SN-SN(1～4)重组质粒转化人大肠埃希菌BL-21内,IPTG诱导表达后再以考马斯亮蓝染色法检测GST融合蛋白的表达.结果 以单/双酶切和基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,考马斯亮监染色法观察到GST融合蛋白的正确表达.结论 重组原核GST.hTudor-SN-SN(1-4)质粒成功构建和表达.

关键词：人类Tudor-SN蛋白、pGEX-4T-1、重组质粒、融合蛋白

所属期刊栏目：7

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划资助项目863计划2007AA02Z115;国家自然科学基金30670441,30970562,30670802,30811130394.30911130165,30970582;天津巿科委国际合作项目07JCZDJC07300;国家自然科学基金重大研究计划项目No.90919032.国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金No.20091202110001,天津市教委重点项目2008ZD01

在线出版日期：2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：483-487