抑制RAGE表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

摘要：

目的 构建特异性针对细胞膜上晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的小干扰RNA(siRNA)腺病毒载体,鉴定其对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞RAGE表达的影响.方法 设计并合成针对大鼠RAGE基因的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,脂质体法转染至QBI293A细胞中包装,获得RAGE-siRNA的重组腺病毒,荧光显微镜观察RAGE-siRNA感染INS-1细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Western印迹检测RAGE的蛋白表达.结果 成功制备RAGE-siRNA重组腺病毒,在INS-1细胞中RAGE-siRNA感染效率达到90 %以上,并能够抑制INS-1细胞RAGE的表达.结论 成功构建了携带RAGE的siRNA重组腺病毒载体,能有效沉默INS-1细胞中RAGE的表达.

关键词：晚期糖基化终末产物受体、腺病毒载体、小干扰RNA、胰岛β细胞

所属期刊栏目：7

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2010-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27