可溶性转氢酶促进链球菌异柠檬酸脱氢酶基因表达的研究

摘要：

目的 构建携带E.coli可溶性吡啶核苷酸转氢酶(UdhA)基因的双启动子双基因表达载体,鉴定此载体系统对表达效率不高的链球菌异柠檬酸脱氢酶(SmIDH)的促进表达.方法 PCR法扩增SmIDH基因,插入pBluescriptⅡ SK(+)得表达载体pSX.从E.coli基因组扩增UdhA基因,插入pBluescriptⅡ SK(+),构建表达载体pUX.再用以pUX为模板PCR扩增lac启动子和UdhA基因片段,插入pSX 中,获得双启动子双基因表达载体 pUS.IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定SmIDH的表达.结果 酶切证实UdhA和SmIDH双基因正确克隆到pBluescriptⅡ SK(+) 中,序列测定显示双基因与 GenBank报道一致及两个lac启动子方向相同,并且初步的表达实验证明UdhA促进了SmIDH的表达.结论 UdhA的表达促进了SmIDH基因的表达,为该表达策略的通用性研究奠定了基础.

关键词：可溶性吡啶核苷酸转氢酶、异柠檬酸脱氢酶、双启动子、双基因

所属期刊栏目：6

分类号：Q71;Q554(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家自然科学基金30500300,30870062;国家教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-06-0558;教育部科学技术研究重点项目206066;安徽省引进海外留学人才基金2005Z032;安徽省教育厅自然科学重点项目2006KJ061A

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-34