中国旱獭IL-10分子的克隆和序列分析

摘要：

目的 克隆旱獭白细胞介素-10(IL-10)全长cDNA序列进行序列分析,为IL-10分子的表达和在土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)感染中的应用奠定基础.方法 根据Genbank的土拨鼠IL-10 cDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取旱獭脾组织总RNA作为模板,RT-PCR扩增旱獭IL-10 cDNA.PCR产物纯化后连接至T载体(pMD18-T),构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10.对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序.对所获得的序列应用分析软件进行分析.结果 RT-PCR扩增产物为685 bp.重组质粒pMD18-T-cmIL-10经EcoR Ⅰ与Pst Ⅰ双酶切提示含目的基因片段.序列分析提示旱獭IL-10的编码序列为537 bp,与土拨鼠IL-10的同源性为100%.结论 成功克隆旱獭IL-10分子,并构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10.

关键词：中国旱獭、白细胞介素-10、序列分析

所属期刊栏目：3

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30271170

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：344-346