"牵引丝蛋白基因"单体六聚物的克隆与原核表达

摘要：

目的克隆与原核表达"牵引丝蛋白基因"单体六聚物,为开展具有不同长度系列的"牵引丝蛋白基因"单体多聚物的功能研究奠定基础.方法以"牵引丝蛋白基因"单体为基础,利用同尾酶聚合法构建含"牵引丝蛋白基因"单体六聚物的重组克隆质粒pUC18-6 S和重组原核表达质粒pET-28a(+)-6S.将pET-28a(+)-6 S转化至大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞感受态菌中,利用IPTG进行诱导.结果重组克隆质粒pUC18-6 S和重组原核表达质粒pET-28a(+)-6 S的测序结果与预期设计序列相同;SDS-PAGE结果发现,目的基因以包涵体的形式表达;薄层扫描分析结果表明,6 S蛋白的表达量约占菌体总蛋白的19%.结论克隆获得了"牵引丝蛋白基因"单体六聚物的重组克隆质粒和重组表达质粒,且重组表达质粒在原核系统中以包涵体的形式表达6 S蛋白.

关键词：牵引丝蛋白基因、六聚物、克隆、表达

所属期刊栏目：3

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

在线出版日期：2006-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：101-104