高致病性禽流感病毒血凝素基因定点突变及其原核表达

摘要：

目的改构高致病性禽流感病毒血凝素基因,建立有效的原核表达体系.方法利用位点特异PCR突变技术同义突变HA1基因中的稀有密码子,将改构的HA1基因克隆到pGEX-4T-1载体中建立4T-1-HA1-m+重组表达质粒,然后转入E.coli BL21 DE3中并用IPTG诱导表达HA1-GST融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测目的蛋白,Western印迹分析表达产物的免疫活性.结果改构的HA1基因能够在大肠埃希菌中有效表达,表达产物能与H5N1亚型高致病性禽流感病毒免疫鼠血清特异性结合.结论提示高致病性禽流感病毒血凝素基因经位点特异PCR突变技术改构后,可以在大肠埃希菌中表达出有免疫活性的血凝素蛋白.

关键词：高致病性禽流感病毒、血凝素基因、定点突变、原核表达

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分类号：Q93(微生物学)

资助基金：科技部科研项目2005CB523000/5;国家科技攻关项目2004BA519A31

在线出版日期：2006-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：8-12