fgfr3基因敲除载体的构建及中靶ES细胞的筛选与鉴定
万方数据知识服务平台
应用市场
我的应用
会员HOT
万方期刊
×

点击收藏,不怕下次找不到~

@万方数据
会员HOT

期刊专题

10.3870/j.issn.1672-8009.2005.05.002

fgfr3基因敲除载体的构建及中靶ES细胞的筛选与鉴定

引用
目的构建成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblast growth factor receptor-3,FGFR3)基因敲除载体,并对中靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR3条件性敲除小鼠模型或FGFR3功能减低小鼠,研究FGFR3在小鼠骨骼等器官发育、损伤修复过程中的作用打下基础.方法在分析小鼠fgfr3基因组DNA序列结构的基础上,设计并构建了针对小鼠fgfr3外显子9、10的条件性基因敲除载体,采用电穿孔法转染ES细胞,用G418与Gancyclovir对电转的ES细胞进行正负筛选,最后对ES细胞克隆做Southern与PCR鉴定.结果对ES细胞正负筛选后共挑取180个克隆;用5'端探针进行Southern杂交鉴定后发现2株阳性克隆;经PCR检测发现这两株克隆fgfr3的8号内含子内的LoxP序列丢失.结论得到两株fgfr3基因中只含有neo基因的ES细胞克隆,fgfr3的表达是降低的,可用来建立FGFR3功能降低的小鼠.

成纤维细胞生长因子3型受体、条件性敲除、同源重组、Cre蛋白、ES细胞

2

Q78(基因工程(遗传工程))

国家重点基础研究发展计划973计划2005CB522604;国家自然科学基金30425023;重庆市科技计划CSTC.2004BA5016

2005-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

331-336

相关文献
评论
暂无封面信息
查看本期封面目录

医学分子生物学杂志

1672-8009

42-1720/R

2

2005,2(5)

相关作者
相关机构

专业内容知识聚合服务平台

国家重点研发计划“现代服务业共性关键技术研发及应用示范”重点专项“4.8专业内容知识聚合服务技术研发与创新服务示范”

国家重点研发计划资助 课题编号:2019YFB1406304
National Key R&D Program of China Grant No. 2019YFB1406304

©天津万方数据有限公司 津ICP备20003920号-1

信息网络传播视听节目许可证 许可证号:0108284

网络出版服务许可证:(总)网出证(京)字096号

违法和不良信息举报电话:4000115888    举报邮箱:problem@wanfangdata.com.cn

举报专区:https://www.12377.cn/

客服邮箱:op@wanfangdata.com.cn