人TREM-1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的系统地研究TREM-1的生物学功能,克隆TREM-1的cDNA,构建原核表达载体后,使其在大肠杆菌中得到表达.方法用RT-PCR从临床患者外周血白细胞中扩增TREM-1 cDNA,将其克隆到克隆载体pGEM-3Z上.经酶切及PCR扩增鉴定、测序后,再克隆到原核表达载体pT7-PL上,转化大肠杆菌BL21(DE3 plys),以IPTG诱导大肠杆菌表达带有组氨酸和人TREM-1蛋白组成的融合蛋白,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳初步鉴定,并对融合蛋白进行纯化.结果酶切电泳和DNA测序结果表明,成功地克隆了人TREM-1 cDNA;SDS-PAGE电泳结果显示相应分子质量37 ku处有含人TREM-1融合蛋白的初步表达,证明了TREM-1原核表达的可行性.

关键词：髓系细胞触发受体-1、克隆、表达、炎症反应

所属期刊栏目：2

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：98-101