10.3969/j.issn.1673-5293.2023.08.009
LncRNA HOXB-AS1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响机制研究
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)同源异型盒基因B-AS1(HOXB-AS1)通过Akt-mTOR自噬通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡的影响及机制.方法 人乳腺癌MCF-7 细胞于 2020 年 6 月 20 购自中国科学院分子细胞科学卓越创新中心.将乳腺癌 MCF-7 细胞分为对照组(Con组,n = 3)、阴性对照组(NC组,n = 3)和 HOXB-AS1 过表达组(HOXB-AS1组,n= 3),通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测 HOXB-AS1 的表达;用CCK-8 法检测MCF-7 细胞的增殖;用细胞迁移实验、细胞T ranswell实验检测MCF-7细胞的迁移及侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡;用Western blot法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Beclin 1、LC3B、p62、p-Akt、p-mTOR,并对检测结果进行统计分析.结果 乳腺癌MCF-7细胞转染后,Con组的 LncRNA HOXB-AS1 相对表达量为 0.15±0.05、NC 组为 0.13±0.03、HOXB-AS1 组为 0.75±0.04,HOXB-AS1组的LncRNA HOXB-AS1相对表达量显著高于Con组和NC组(t= 16.030,P= 0.000).MCF-7细胞经HOXB-AS1处理24h后,Con组的MCF-7 细胞活力为(100.00±9.13)%、NC组为(100.00±2.94)%、HOXB-AS1 组为(60.50±5.72)%,HOXB-AS1组的MCF-7细胞活力显著低于Con组和NC组(t= 7.428,P= 0.000).转染HOXB-AS1后,Con组的划痕愈合速度为(61.00±3.61)%、NC组为(59.83±2.26)%、HOXB-AS1组为(39.03±3.61)%,HOXB-AS1组的划痕愈合速度显著低于Con组和NC组(t= 16.090,P= 0.002).转染HOXB-AS1后,Con组的MCF-7细胞侵袭数为(343.36±20.82)个、NC组为(316.00±29.46)个、HOXB-AS1组为(105.02±15.00)个,HOXB-AS1组的MCF-7细胞侵袭数显著低于Con组和NC组(t= 16.093,P= 0.000).转染 HOXB-AS1 后,Con组的 MCF-7 细胞凋亡率为(93.47±4.72)%、NC组为(90.67±7.37)%、HOXB-AS1 组为(31.33±2.59)%,HOXB-AS1组的MCF-7 细胞凋亡率显著低于Con组和NC组(t= 19.992,P= 0.000).HOXB-AS1 降低了p-Akt、p-mTOR蛋白的表达,上调了自噬相关蛋白Beclin 1、LC3B的表达,下调了自噬相关蛋白p62 的表达,增强了MCF-7 细胞的自噬活性.结论 HOXB-AS1抑制了乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,其作用可能与抑制Akt/mTOR通路介导的自噬有关.
同源异型盒基因B-AS1、乳腺癌、自噬、蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白
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R173(妇幼卫生)
湖北省卫计委科研基金项目WJ2017Z026
2023-09-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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