10.3969/j.issn.1673-5293.2014.01.017
S100A6 siRNA对卵巢癌细胞生物学行为的影响
目的 探讨S100A6蛋白表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响.方法 以卵巢癌细胞A2780为研究对象,利用RNA干扰技术特异性降低S100A6表达水平后,分别用实时定量PCR和Western blot检测S100A6 siRNA对S100A6表达水平的抑制效率.用流式细胞术检测S100A6 siRNA转染前后A2780细胞的细胞周期变化,用Transwell试验观察S100A6 siRNA转染前后侵袭能力的变化,用MTT法检测S100A6 siRNA对A2780细胞顺铂敏感性的影响.结果 S100A6 siRNA转染组细胞中S100A6mRNA和蛋白表达水平与S100A6 siRNA呈浓度、时间依赖性明显下调,抑制效率可达63.75% ~ 80.68%.在与空白对照组和阴性对照siRNA组相比,S100A6 siRNA出现了G0/G1期比例升高,S期比例降低,差异有统计学意义(x2=6.211,P=0.045).Transwell试验表明,6.25、12.5nmol/L S100A6 siRNA分别转染48h后,A2780细胞穿膜细胞数目分别为78±7.51和27±8.24,与阴性对照组(91±5.78)相比,穿膜细胞显著减少,差异有统计学意义(x2=3.898,P =0.048).MTT法测定S100A6 siRNA转染后A2780细胞对顺铂敏感性的影响结果显示,S100A6 siRNA引起顺铂对A2780细胞的抑制率增加(x2=9.609,P=0.022),而空白对照组和阴性对照siRNA组之间无明显差异.对顺铂半数致死剂量(IC50)的计算结果显示,分别转染6.25、12.5nmol/L S100A6siRNA的A2780细胞对顺铂IC50值分别为13.42 μmo]/L和11.32 μmol/L,与空白对照组和阴性对照siRNA组相比均显著降低,差异有统计学意义(x2=5.566,P=0.018).结论 S100A6 siRNA转柒卵巢癌A2780细胞后,引起A2780细胞G0/G1期阻滞,侵袭能力降低,同时对顺铂的敏感性有所增强,可能是卵巢癌靶向治疗的候选基因.
卵巢癌、钙结合蛋白S100A6、小干扰RNA、侵袭转移、顺铂
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R737.31(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81172458;国家自然科学基金青年基金资助项目81302243;陕西省重点课题资助项目2012KTCL03-08
2014-05-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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