RNA干扰对雄激素合成关键酶17α-羟化酶/17,20裂解酶作用的实验研究

摘要：

目的:探讨细胞色素P450 17α-羟化酶/17,20裂解酶(CYP17)小干扰RNA (siRNA)对CYP17基因表达和多囊卵巢综合征(PCOS)卵泡膜细胞雄激素合成的抑制效果.方法:合成4条靶向CYP17基因的特异性siRNA和非特异性siRNA.将0.4μg携带报告基因增强型绿色荧光蛋白和CYP17基因的质粒和siRNA共转染入HeLa细胞,荧光显微镜观察及流式细胞术检测绿色荧光蛋白的表达反映对CYP17表达的影响,筛选抑制效果最佳的siRNA.卵泡膜细胞取自PCOS患者和非PCOS妇女各5例,将筛选出的最佳CYP17 siRNA以最佳浓度转染人卵泡膜细胞,荧光定量实时逆转录多聚酶链反应检测CYP17 mRNA的表达,并且检测培养液中CYP17作用产物雄烯二酮和前体孕酮水平.结果:siRNA 1221处理后,HeLa细胞中外源性CYP17的表达显著降低,抑制率达50%,卵泡膜细胞中CYP17 mRNA水平和雄烯二酮产生降低,但与对照组比较,统计学上无显著差异.结论:RNA干扰技术可能提供一种PCOS高雄激素基因治疗的新方法.

关键词：RNA干扰、细胞色素P450、17α-羟化酶/17、20裂解酶、雄激素合成、多囊卵巢综合征、卵泡膜细胞

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分类号：R58;TQ4

资助基金：国家自然科学基金30571956,30300372;广东省自然基金31690,21874;GZST2004J-C0111

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：219-221