水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E的原核表达及免疫反应初步评价

摘要：

目的 用原核表达系统表达水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)糖蛋白(glycoprotein,g)E胞外区,并初步评价其免疫效果.方法 将VZV gE胞外区经密码子优化后,克隆至原核表达载体pET-48b中,测序鉴定后,转化进感受态细胞BL21(DE3)中,用异丙基硫代β-D-半乳糖苷(isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导其在大肠杆菌中表达.采用SDS-PAGE电泳,通过免疫印迹试验(western blot,WB)鉴定其特异性.用Ni2+-NTA柱对目的蛋白进行纯化并复性后,免疫Balb/c小鼠,用ELISA法检测小鼠血清的特异性及效价.结果 以包涵体的形式成功表达了VZV gE胞外区,纯化复性后纯度约为90％.WB鉴定其具有良好的免疫反应性.免疫小鼠后可产生与商品化水痘减毒活疫苗水平相当的特异性抗体.结论 原核表达系统成功表达VZV gE并评价其诱导机体特异性免疫反应的能力,为VZV疫苗的研发提供科学依据.

关键词：水痘-带状疱疹病毒、糖蛋白E、原核表达、免疫评价

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在线出版日期：2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：108-111