PEF1在肠道病毒71型复制中的作用研究

摘要：

目的 探讨PEF1(penta-EF-hand domain containing 1)对肠道病毒7 1型(enterovirus 71,EV71)复制和感染的影响.方法 采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)方法,敲低人恶性胚胎横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma,RD)中PEF1的表达,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹(western blot,WB)实验检测siRNA的效率.通过RT-PCR、WB和空斑实验检测并比较对照细胞和PEF1敲低细胞中EV71的复制水平.利用免疫荧光检测EV71感染后PEF1在细胞中的定位.采用CRISPR-Cas9技术构建PEF1敲除的RD细胞系,并通过测序和WB实验验证敲除效果,同时使用WB实验检测PEF1敲除的细胞中EV71的复制.结果 siRNA能够显著降低RD细胞中PEF1的表达.EV71在PEF1敲低的细胞中的复制水平低于对照细胞.EV71感染后细胞内PEF1的表达水平并未发生改变,但是在细胞内的定位发生了改变.PEF1敲除细胞中EV71的复制水平也显著降低.结论 敲低或敲除PEF1的表达能抑制EV71的复制,EV71感染并不影响PEF1的表达但改变其在细胞内的定位.

关键词：肠道病毒71型、病毒复制、penta-EF-hand domain containing 1

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资助基金：国家自然科学基金81672032;国家科技重大专项课题2018ZX10301401;中国医学科学院医学与健康科技创新工程2016-I2M-1-014、2016-I2M-1-005National Natural Science Foundation of China81672032;National Major Sciences and Technology Project for Control and Prevention of Major Infectious Disease in China2018ZX10301401;CAMS Innovation Fund for Medical Sciences2016-I2M-1-014,2016-I2M-1-005

在线出版日期：2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：93-97