10.3969/j.ISSN.1000-744X.2011.09.002
大鼠脾源性内皮祖细胞培养及鉴定
目的 培养、鉴定大鼠脾源性内皮祖细胞.方法 机械损伤大鼠脾脏,用密度梯度离心法收集单个核细胞层,富含胎牛血清EMDM培养液培养,观察细胞形态,将培养第7天内皮祖细胞与DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白37℃孵育4h,以检测内皮祖细胞对Dil-乙酰化低密度脂蛋白的摄取,再用20 g/I,多聚甲醛固定细胞10 min,固定后用PBS浸洗,将FITC标记的凝集素I加入上述标本,37℃孵育1 h,PBS浸洗,通过激光共聚焦显微镜鉴定FITC-凝集素1和DiI-乙酰化低密度脂蛋白.结果 贴壁细胞呈现类圆形、纺锤形或多边形,7~14 d可见部分贴壁细胞生长呈"铺路石"样外观.胞浆摄取DiI-乙酰化低密度脂蛋白显示红色,胞膜结合FITC-凝集素I显示绿色,双染色阳性细胞为黄色,为正在分化的内皮祖细胞.结论 大鼠脾源性内皮祖细胞分离、培养简单、可行.
内皮祖细胞、脾源性、细胞培养、细胞鉴定、大鼠
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R.332
贵州省科技厅基金项目黔科合SY字20093100号
2011-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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