香蕉枯萎病菌4号生理小种β2-微管蛋白基因敲除与表型分析

摘要：

[目的]克隆并鉴定香蕉枯萎病菌(Foc4)β2-微管蛋白(β2-tub)基因,阐明β2-tub在多菌灵的抗药性及在病原菌致病过程中发挥的作用.[方法]采用PCR技术克隆了β2-tub的序列全长,并对其进行生物信息学分析.应用Splitmarker同源重组技术获得Foc4的β2-tub基因敲除突变体,并对其突变体的生物学表型、致病力及其对多菌灵的敏感性进行测定.[结果]生物信息学分析表明,Foc4 β 2-tub基因全长为1 694 bp,cDNA编码区全长1 347 bp,由4个内含子和5个外显子组成,编码蛋白含448个氨基酸.Foc4对多菌灵表现为敏感(EC50=0.51 μg·mL-1),与Foc4相比,β 2-tub基因敲除突变体对多菌灵的敏感性(EC50=0.36 μg·mL-1)表现显著增强,差异显著(p＜0.05).与Foc4相比,β2-tub基因敲除突变体的生物学表型没有变化,对巴西蕉苗的致病力明显减弱.[结论]β2-tub基因具有高度保守性,β2-tub基因敲除突变体对细胞壁选择性压力、氧化压力和渗透压力均没有影响,但致病力下降,同时β2-tub基因的变化会引起Foc4对多菌灵抗性的改变.

关键词：香蕉枯萎病菌、β2-微管蛋白、基因敲除、致病力

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分类号：S668.1(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金31471738、31571957、31661143003;现代农业产业技术体系专项CARS-31-07;农业部南亚办专项151721301082352712;热科院托举工程项目1630042018010

在线出版日期：2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1467-1477