莲雾实时荧光定量PCR内参基因的筛选和验证
[目的]莲雾果实品质不稳定和冬季低温寒害是生产上的两大问题,筛选稳定可靠的内参基因,以便开展莲雾品质形成和低温胁迫响应分子机制研究.[方法]以‘紫红’‘黑珍珠’‘翡翠’3个莲雾品种为材料,利用qRT-PCR检测7个候选内参基因ACT-7、GAPDH、UBQ、α-TUB、CYP20-1、EF-2和APRT-5在果实发育和低温胁迫时的表达水平,通过geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder软件进行基因稳定性评价.[结果]不同软件分析结果不同,geNorm、NormFinder和RefFinder结果相似,果肉发育过程、果皮发育过程、低温胁迫下表达最稳定的内参基因分别是ACT-7、α-TUB和CYP20-1,BestKeeper则显示UBQ为表达最稳定的基因.用筛选的内参基因a-TUB和UBQ分析莲雾花青苷合成途径中F3H基因的表达,2者表达规律较一致.[结论]莲雾果肉发育过程、果皮发育过程、低温胁迫下最适的内参基因数分别为4个(ACT-7、GAPDH、UBQ、α-TUB)、2个(α-TUB、UBQ)和2个(CYP20-1、UBQ).
莲雾、内参基因、实时荧光定量PCR
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S667.9(果树园艺)
福建省公益类科研院所专项2017R1013-4;福建省农业科学院创新团队STIT2017-2-4;福建省农业科学院院管一般项目A2017-7
2018-06-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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