苹果MdRCD1基因的表达分析以及功能的初步鉴定

摘要：

[目的]分离克隆苹果MdRCD1基因,分析其蛋白结构和逆境响应,并初步鉴定MdRCD1在苹果愈伤中的功能.[方法]同源克隆MdRCD1并测序,用DNAman和MEGA5相关软件分析MdRCD1氨基酸序列以及进化关系,不同逆境处理‘嘎拉’苹果组培苗,qRT-PCR分析MdRCD1在逆境条件下的表达量.农杆菌介导的遗传转化方法获得过量表达MdRCD1的转基因愈伤,不同盐浓度处理野生型和转基因愈伤,观察愈伤的长势,检测愈伤的鲜质量、脯氨酸和丙二醛含量,鉴定MdRCD1的初步功能.[结果]从‘嘎拉’苹果中克隆了MdRCD1 (MDP0000234325)基因.该基因ORF为1 803 bp.通过进化树和蛋白同源性分析,表明苹果MdRCD1和中国白梨PbRCD1进化亲缘关系最近.在MdRCD1的N端有1个保守的WWE结构域,1个PARP催化中心,在C端有1个RST结构域.qRT-PCR实验表明MdRCD1在苹果各个组织器官中都有表达,在茎中的表达量高于其他组织;同时MdRCD1的表达受NaCl、ABA、渗透胁迫等逆境胁迫的诱导.通过农杆菌侵染获得过量表达MdRCD1转基因苹果愈伤.盐胁迫处理条件下,过量表达MdRCD1的抗性明显提高.[结论]MdRCD1在进化过程中比较保守,苹果不同组织中都有表达,过量表达MdRCD1苹果愈伤的抗盐性得到提高.

关键词：苹果、MdRCD1、基因克隆、表达分析、盐胁迫

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分类号：S661.1(果树园艺)

资助基金：农业部公益性行业科研专项21203075-3;国家自然科学基金31471854;国家自然科学基金重点项目31430074

在线出版日期：2017-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：525-533