‘红肉蜜柚’CmMYB330基因的分离与表达分析
[目的]分析‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化相关的MYB转录因子基因特征与表达模式,探讨MYB转录因子在蜜柚汁胞木质素代谢过程中的作用机制,为研究蜜柚汁胞粒化发生机制提供借鉴.[方法]以‘红肉蜜柚’果实汁胞为试材,参考甜橙MYB全基因组分析,利用生物信息学分析和PCR技术克隆CmMYB330的编码区序列及其5’端调控序列,并对序列进行生物信息学分析.利用实时荧光定量PCR技术对CmMYB330在‘红肉蜜柚’果实汁胞不同发育时期和不同部位的表达情况进行分析.利用农杆菌介导法将CmMYB330与GFP的融合表达载体注射转化到烟草叶片中进行亚细胞定位分析.利用酵母双杂交系统对CmMYB330进行转录激活活性分析.[结果]CmMYB330的编码区序列长度为942 bp,编码313个氨基酸,预测为核定位蛋白,为典型的R2R3 MYB转录因子.CmMYB330与甜橙Cs1g19400.1、AmMYB330等亲缘关系近,都属于R2R3 MYB第4亚组.CmMYB330的5’端调控序列为起始密码子上游-1 748 bp序列,预测该序列含有TATA-box、CAAT-box 2个启动子核心元件,3个MBS,1个AC-I,1个5UTR Py-richstretch,还有大量激素(如赤霉素、乙烯、水杨酸等)响应元件.CmMYB330表达量在‘红肉蜜柚’果实汁胞发育过程中有起伏,但总体呈现上升趋势,表达量在花后208 d达到最大,之后开始下降.在转化p-super 1300-CmMYB330-GFP的烟草叶片细胞核中检测到绿色荧光信号,与预测结果一致,说明CmMYB330定位在细胞核中.在Y2H Gold酵母中,CmMYB330表现为没有转录激活活性.[结论]克隆了‘红肉蜜柚’MYB转录因子CmMYB330编码区序列及其5’端调控序列,CmMYB330属于R2R3 MYB第4亚组,与汁胞粒化相关,为核定位蛋白,同时分析了其在‘红肉蜜柚’果实汁胞发育过程中的表达水平,总体呈上升趋势.为进一步研究CmMYB330与蜜柚汁胞粒化的关系奠定了基础.
’红肉蜜柚’、转录因子、CmMYB330、5’端调控序列、表达分析
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S666.3(果树园艺)
福建省科技重大专项2013NZ0002;国家科技支撑计划2014BAD15B01;福建省科技计划星火项目2016S0022;清远市科技计划2015C002
2017-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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268-278
