苹果叶片叶绿体分离及其蛋白提取、双向电泳方法的优化

摘要：

[目的]筛选苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取方法,建立叶绿体蛋白双向电泳分离技术体系.[方法]以苹果叶片为试材,采用4种Percoll密度梯度离心法提取苹果叶片叶绿体,检测提取叶绿体的完整度、纯度及提取率.采用酚抽提法、改良酚抽提法提取叶绿体蛋白,检测蛋白样品的质量.优化胶条长度、上样量、等电聚焦程序、分离胶浓度等双向电泳条件.[结果]Percoll密度梯度离心法D提取的叶绿体纯度高、提取率高,优于其他3种方法;改良酚抽提法提取的叶绿体蛋白,经2-DE分离所得蛋白点数多、分离效果好,优于酚抽提法.蛋白样品经优化后的双向电泳体系分离,获得了较为理想的2-DE图谱.[结论]Percoll密度梯度离心法D、改良酚提法适于苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取.苹果叶片叶绿体蛋白使用优化后的双向电泳体系进行分离,可以获得比较理想的2-DE图谱.

关键词：苹果、叶片、叶绿体蛋白、提取方法、双向电泳

所属期刊栏目：33

分类号：S661.1(果树园艺)

资助基金：农业部现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-28;国家科技支撑计划项目2013BAD02B01

在线出版日期：2016-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：752-761