中国山葡萄‘双红’胺氧化酶(amine oxidase)基因的抗霜霉病研究

摘要：

[目的]探究高抗霜霉病的中国山葡萄‘双红’中胺氧化酶(VaAO)在抗葡萄霜霉病中的作用.[方法]以中国山葡萄‘双红’为试材,采用RT-PCR技术,克隆山葡萄‘双红’的AO基因,命名为VaAO;利用RT-qPCR在转录水平上分别检测了抗病的山葡萄‘双红’和感病的欧亚种葡萄‘赤霞珠’接种霜霉菌后AO的表达模式;通过农杆菌介导的瞬时转化法,使VaAO分别在本氏烟草和葡萄‘赤霞珠’中瞬时过表达;利用DAB染色法,检测H2O2的积累.[结果]VaAO基因的开放阅读框(ORF)长2184bp,编码727个氨基酸.经BLAST比对发现VaAO氨基酸序列与欧亚种葡萄‘黑比诺’的氨基酸序列同源性高达99％.定量结果表明:抗病的‘双红’和感病的‘赤霞珠’的AO基因均受到霜霉菌诱导,且相对表达量都在接种72 h后达到最高峰.值得注意的是,VaAO在接种后24h表现出显著上调.VaAO在烟草中瞬时表达后发现其蛋白定位在细胞核和细胞膜中.VaAO在‘赤霞珠’叶片中瞬时过表达能够显著提高叶片中H2O2的积累和抵抗霜霉病的能力.[结论]成功克隆了山葡萄‘双红’的VaAO基因,定量分析和瞬时表达均表明VaAO基因在参与葡萄抗霜霉病的过程中发挥了重要作用.

关键词：山葡萄’双红’、胺氧化酶、RT-qPCR、瞬时表达、亚细胞定位

所属期刊栏目：33

分类号：S663.1(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金31471754

在线出版日期：2016-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：534-541