葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化

摘要：

SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16(45)正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2+浓度.综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为:Mg2+2.0 mmol·L-1、dNTPs 0.3 mmol·L-1、Taq酶1.0 U、引物0.3 μmol·L-1、DNA模板30 ng,总体积20 μL.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变件1 min,54℃退火1 min,72℃复性2 min,34个循环;最后72℃延伸8 min.该反应体系在20个葡萄品种的验证中表现出良好的稳定性和可重复性,该反应体系的建立为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建、分子标记辅助选择育种等研究提供了新的技术手段.

关键词：葡萄、SCoT、正交设计、单因素试验、体系优化

所属期刊栏目：28

分类号：S663.1(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金NSFC:30800742;河南省教育厅自然科学研究计划2009B210003;国家葡萄产业技术体系nycytx-30-zy-01

在线出版日期：2011-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：209-214