山楂ISSR分析体系的建立和优化

摘要：

为在DNA分子水平上对山楂种质资源进行分析奠定基础,对退火温度、循环次数、DNA模板质量、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶的种类和浓度等影响ISSR反应的因素进行研究,建立并优化了山楂的ISSR分析体系.优化的山楂ISSR分析体系为:采用改进的CTAB法或QIAGEN试剂盒法提取总DNA;PCR反应体积为20μL,内含1×PCR反应缓冲液(Promega公司),3.0 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTP,0.3 μmol/L引物,0.5 U Taq DNA聚合酶(天根公司),50 ng总DNA;扩增程序为94℃ 3 min;94℃ 30 s,退火温度1 min,72℃ 2 min,38个循环,72℃ 7 min.筛选出了10个适宜山楂遗传分析的ISSR引物.

关键词：山楂、ISSR、优化

所属期刊栏目：24

分类号：S661.5(果树园艺)

资助基金：沈阳农业大学校科研和教改项目

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：313-318