超声波辅助农杆菌介导八棱海棠转rolC基因

摘要：

应用超声波辅助农杆菌介导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,以期提高转化效率并获得转基因植株.利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理时期和农杆菌悬浮液中乙酰丁香酮(As)浓度对rolC基因转化率的影响.结果表明,叶盘在D600nm为0.6且含有75 mg/L As的农杆菌悬浮液中侵染2 min后,用功率为100 W的超声波处理30 s,再浸泡2.5 min,然后放到再生培养基上共培养3 d,能获得最佳的gus基因瞬间表达率.最佳处理条件下转化683枚八棱海棠叶片,共得到138个抗性愈伤组织和15株抗性苗,转化率为2.2%.GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有12个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因.

关键词：八棱海棠、超声波辅助农杆菌转化、rolC基因

所属期刊栏目：23

分类号：S661.1(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金30370987;江苏省应用基础研究计划项目BJ200018

在线出版日期：2006-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-663