多光谱法和分子模拟技术研究氟罗沙星与人血清白蛋白的相互作用

摘要：

氟罗沙星(FLRX)是一种含氟喹诺酮类抗菌素,有关它对人血清白蛋白(HSA)的影响及作用机理,特别是对 H SA二级结构的影响及内滤光(影响荧光数据的准确性)校正的研究报道较少。采用多光谱法和分子模拟技术探究了 FLRX 与 HSA的相互作用。荧光光谱结果表明,FLRX对 HSA的猝灭是由于形成结合常数在105 L·mol-1水平上的1∶1 FLRX-HSA基态复合物引起的静态猝灭作用。由 Van’t Hoff方程确定的FLRX与 HSA结合过程中的ΔH=-107.99 kJ·mol-1和ΔS=-240.99 J·mol-1·K-1,表明FLRX与H SA之间的主要作用力是氢键和范德华力。同步荧光光谱、红外光谱和三维荧光光谱结果表明,静态猝灭过程所产生的中间复合物使 HSA的构象发生改变。通过对 HSA与 FLRX作用前后红外光谱酰胺Ⅰ带进行傅里叶去卷积和分峰拟合,获得代表 H SA二级结构的不同子峰,对各子峰进行二级结构归属,根据各子峰的积分面积计算出各二级结构的相对百分含量。结果表明：FLRX与 HSA结合后,α-螺旋从51.5%减小到33.2%,β-折叠从30.3%减小到20.7%,β-转角从15.6%增加到33.6%。取代实验显示FLRX与 HSA的结合位点在HSA的site Ⅰ(亚域ⅡA)。分子对接实验结果表明,FLRX可以通过氢键、疏水作用和范德华力等多种作用力很好的结合在亚域ⅡA的疏水腔中。实验获得的可信数据将有助于阐明FLRX与 HSA的作用机制,也有助于理解 FLRX在储运过程中对蛋白质功能的影响。

关键词：人血清白蛋白、氟罗沙星、多光谱法、分子对接

所属期刊栏目：37

分类号：O657.3(分析化学)

资助基金：The National Natural Science Foundation of China21177163;111 Project B08044,Special Guidance Fund of Building World First-class Universities;Characteristic Development of Minzu University of Chinaydzxxk201619;Coordinate Development of First-class and First-class University Discipline Construction Funds10301-0150200604;The Academic Team Construction Project of Minzu University of China2015MDTD25C&13C;2015MDTD08C

在线出版日期：2017-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：327-332