快速简便的杂交检测DNA

摘要：

Southern杂交作为黄金标准，已广泛运用于DNA的检测上。但是，经典的southern杂交和近年来一些DNA检测方法存在放射性污染，操作繁琐，耗时，对实验仪器设备要求高等问题。本文利用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的dUTP 合成DNA探针建立了快速检测DNA的液相杂交方法。该方法包括探针制备、液相杂交、电泳分离和信号检测四个步骤，并在此基础上对FITC-双链和FITC-单链探针的杂交效果作了比较。结果显示，使用FITC标记的两种探针都能取得良好的实验结果，但单链探针较双链的检测灵敏度高；双链DNA探针可以检测出0．8μg（3．64×10-13 mol）的质粒，而单链DNA探针可以检测出0．38μg（1．82×10-13 mol）的质粒DNA，在检出效率上是前者的2．1倍。整个检测过程操作简便，可在3 h内完成，可较好地解决了其他DNA检测方法存在的费时费力的问题。

关键词：液相杂交、FITC-12-dUTP、southern杂交、DNA检测、荧光

分类号：Q988(人类学)

资助基金：FundationNatural Science Foundation of China31070276，31270360

在线出版日期：2014-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1577-1581