多酚与蛋白质相互作用的荧光内滤效应校正方法的选择

摘要：

用荧光猝灭法研究猝灭剂与荧光供体的相互作用时，内滤效应会使分析结果不准确，需加以校正，其中物理与化学方法存在操作复杂、耗资大等缺点，而数学方法简便快捷，较易推广使用。采用荧光光谱法分析酚类物质与蛋白质的相互作用时内滤效应明显，然而目前针对酚类物质与蛋白质作用的荧光校正，国内外鲜见报道。以柿单宁级分（PT40）、A型连接ECG二聚体和EGCG为多酚化合物的代表，以中华眼镜蛇磷脂酶A2（PLA2）为蛋白模型，比较了四种数学公式的校正结果，以经典Stern-Volmer回归方程的K值、线性相关性及截距为评价标准，优选一种适用于多酚物质与蛋白质作用的荧光校正方法，并以PT40-PLA2为例，分析校正前后的差异。结果表明，用Gauthier等建立的数学公式进行校正后， K值有所降低，线性相关性变好且截距更接近于1，此外用该式对PT40-PLA2体系进行荧光校正后 PT40与 PLA2相互作用的结合常数仅为校正前的60％，且对两者相互作用力类型的判断更加准确，推断该式更适合于多酚与蛋白质作用的荧光内滤效应校正。

关键词：荧光猝灭、多酚、蛋白质、内滤效应、数学校正

分类号：O644(物理化学（理论化学）、化学物理学)

资助基金：国家自然科学基金项目31271833;新世纪优秀人才支持计划NCET-12-0865;公益性行业农业科研专项201203047

在线出版日期：2014-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：116-121