同步荧光法测定生物样品中蛋白含量的研究

摘要：

基于5-甲基尿苷(5-Methyluridine)与血清白蛋白(HSA)相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中HSA的浓度呈良好的线性关系,建立了以5-甲基尿苷为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质总含量的新方法.文章考察了△λ值、反应介质、试剂用量、离子浓度、试剂加入顺序、反应时间、反应温度等因素对体系同步荧光的影响.在选定的最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与血清白蛋白在1.38～575.2μg·mL-1范围内的线性相关系数为0.998 1,方法的检测限可达0.12μg·mL-1.运用本方法对人血清、唾液和尿液等牛物样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在98.7%～103.8%之间.对11份5-甲基尿苷空白溶液进行平行测定,其相对标准差为1.56%.还考察了一些常见离子和有机物存在时对蛋白质测定的影响.结果显示,本方法具有简单、快速、灵敏度较高、线性范围宽、体系稳定、精密度高、重现性好等优点.该法可直接用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定,结果令人满意.

关键词：5-甲基尿苷(5-Methyluridine)、人血清白蛋白(HSA)、同步荧光光谱、分子探针

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分类号：O0657.3

资助基金：国家自然科学基金项目20673034,20772024;河南省教育厅自然科学基金项目2006150012;河南省新乡市科技攻关项目06G086

在线出版日期：2009-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2531-2534