K562白血病细胞中Musashi2干扰慢病毒载体的构建和鉴定

摘要：

目的:构建干扰Musashi 2(Msi2)的慢病毒载体,并探究其在K562白血病细胞株中的干扰效率.方法:将两个Msi2干扰片段分别连接入GV418慢病毒载体,与pHelper1.0、pHelper2.0辅助载体共转染入293T细胞进行慢病毒包装.提取细胞上清感染白血病K562细胞,并用嘌呤霉素药物稳筛,获取稳定感染细胞株.定量PCR和western blot分别检测K562细胞内Msi2的干扰效率.结果:与对照组比较,干扰组shMsi2-1和shMsi2-2的Msi2 mRNA水平分别降为3％和28％(P＜0.05);与对照组相比,优选出的shMsi2-1组中Msi2蛋白水平也显著下降(P＜0.05).结论:成功构建Msi2干扰慢病毒载体并显著沉默白血病K562细胞中Msi2的表达,为后续研究Msi2在白血病中的功能和机制奠定实验基础.

关键词：musashi2、白血病、慢病毒载体

所属期刊栏目：39

分类号：R730.2(肿瘤学)

资助基金：江西省卫生计划生育委员会科技计划项目20165361;赣南医学院一般科研课题YB201404

在线出版日期：2019-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：451-454