Lnc-NEAT1吸附miR-1224激活NF-κB通路促进SCI大鼠骨质流失
目的 探讨长链非编码RNA富含核的丰富转录物 1(Lnc-NEAT1)对脊髓损伤(SCI)大鼠骨质流失的调控机制.方法 64 只Wistar大鼠随机分为SCI组[脊髓横断(T10)全切术建立SCI,n =56]和假手术组(sham组)(仅切开皮肤即缝合,n =8).随机选择48 只SCI组的大鼠于术后 10d随机分为6 组进行药物注射,包括SCI+Lnc-NEAT1 过表达载体组(SCI+pcDNA-NEAT1 组)、SCI+pcDNA阴性对照组(SCI+pcDNA-NC组)、SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224 拟似物组(SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic组)、SCI+pcDNA-NEAT1+mimic 阴性对照组(SCI+pcDNA-NEAT1+mimic-NC 组)、SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic+NF-κB 抑制剂 QNZ 组(SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic+QNZ组)、SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic+DMSO组.治疗 10d后通过micro-CT检测骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th).qPCR法检测 Lnc-NEAT1、miR-1224、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、干扰素(IFN)-γ、可溶性白细胞介素2 受体(sIL-2R)的表达.Western blot测NF-κB、磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)的表达.荧光素酶基因报告实验检测Lnc-NEAT1 和miR-1224 的直接调控关系.结果 与sham组比,SCI组的miR-1224 表达水平降低(P＜0.05),Lnc-NEAT1、NF-κB p65、p-NF-κB p65 的表达量上调(均P＜0.05).与SCI+pcDNA-NC组相比,SCI+pcDNA-NEAT1 组的miR-1224 表达水平和BV/TV、Tb.N、Tb.Th的值都降低(均P＜0.05),而Tb.Sp的值和Lnc-NEAT1、TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ、sIL-2R、NF-κB p65、p-NF-κB p65 的表达量上调(均 P＜0.05).SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic 组抑制了 SCI+pcDNA-NEAT1 组的上述效果(均P＜0.05),但不影响Lnc-NEAT1 的水平.SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic+QNZ组进一步增加了SCI+pcDNA-NEAT1+miR-1224-mimic 组的治疗效果,使BV/TV、Tb.N、Tb.Th的值都被上调(均P＜0.05),而Tb.Sp的值和TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ、sIL-2R、NF-κB p65、p-NF-κB p65 的表达量都被抑制(均P＜0.05).另外证实,Lnc-NEAT1 通过"分子海绵"机制直接抑制miR-1224 的表达.结论 Lnc-NEAT1 通过抑制miR-1224 激活NF-κB信号抑制SCI大鼠的骨丢失并减轻免疫炎症反应.
富含核的丰富转录物1、SCI大鼠、骨丢失、免疫炎症、微小RNA-1224、NF-κB
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R744;R392.1(神经病学与精神病学)
海南省卫生健康行业科研项目21A200002
2023-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
712-719
