CircRHOT1通过调控miR-29b/KDM2A对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响
目的 探讨环状RNA RHOT1(circRHOT1)对微小RNA-29b-3p(miR-29b-3p)/赖氨酸去甲基化酶2A(KDM2A)轴的调控作用及对膀胱癌(BCa)细胞增殖和迁移的影响.方法 取人输尿管上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和BCa细胞(5637、TCCSUP、T24和UM-UC-3),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中circRHOT1、miR-29b-3p和KDM2A mRNA表达.取T24细胞,分为对照组、si-NC组、si-circ-RHOT1组、si-circRHOT1+anti-NC组、si-circRHOT1+anti-miR-29b-3p组.采用RT-qPCR检测各组细胞中circRHOT1、miR-29b-3p和KDM2A mRNA表达水平;CCK-8法检测各组细胞的增殖活性;Tran-swell小室法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测KDM2A和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达;双荧光素酶报告基因和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证T24细胞中circRHOT1、miR-29b-3p和KDM2A的靶向关系.结果 与SV-HUC-1细胞相比,BCa细胞(T24、5637、TCCSUP和UM-UC-3)中circRHOT1、KDM2A mRNA水平显著升高,miR-29b-3p水平显著降低(P<0.05).敲低circRHOT1后,与对照组、si-NC组相比,si-circRHOT1组KDM2A的mRNA和蛋白水平、细胞活力、迁移和侵袭能力、N-cadherin、Vimentin水平均降低,miR-29b-3p、E-cadherin水平升高(P<0.05);抑制miR-29b-3p表达可升高KDM2A表达,并减弱敲低circRHOT1对增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05).双荧光素酶报告基因和RIP实验证实circRHOT1可靶向负调控miR-29b-3p表达,KDM2A是miR-29b-3p的靶标.结论 敲低circRHOT1可能通过靶向上调miR-29b-3p来抑制KDM2A表达,进而抑制BCa细胞增殖、迁移和侵袭.
环状RNA RHOT1、膀胱癌、微小RNA-29b-3p、赖氨酸去甲基化酶2A
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R737.14;R699.5(肿瘤学)
河南省高等学校重点科研项目21A320037
2023-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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543-549
