过表达lncRNA HCG18调控miR-107/CDKN2B轴对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究
目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控miR-107/周期蛋白依赖激酶抑制因子2B(CDKN2B)轴对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测60例PTC患者癌组织、癌旁组织及人正常甲状腺上皮细胞TEC及人PTC细胞WRO、TPC-1、SW579中HCG18、miR-107、CDKN2B蛋白表达;将WRO细胞分为CK组、si-NC组、si-HCG18组、pcDNA组、pcDNA-HCG18组、pcDNA-HCG18+mimic NC组、pcDNA-HCG18+miR-107 mimic组,qRT-PCR检测各组细胞HCG18、miR-107表达;CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;Western blot检测CDKN2B、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶实验验证HCG18和miR-107、miR-107和CDKN2B的关系.结果 在PTC组织和PTC细胞中,HCG18、CDKN2B蛋白低表达,miR-107高表达,且在WRO细胞中HCG18、CDKN2B蛋白水平最低,miR-107表达最高(P<0.05),因此,选择WRO细胞进行转染.与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18、CDKN2B蛋白表达降低,miR-107表达升高(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18、CDKN2B蛋白表达升高,miR-107表达降低(P<0.05);与pcDNA-HCG18+mimic NC组比较,pcDNA-HCG18+miR-107 mimic组HCG18表达变化差异无统计学意义(P>0.05),miR-107表达升高,CDKN2B蛋白表达降低(P<0.05);上调HCG18可抑制WRO细胞增殖、侵袭、迁移及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达,而下调HCG18则呈相反趋势;过表达miR-107可减弱上调HCG18对WRO细胞增殖、侵袭与迁移的抑制作用;HCG18与miR-107、miR-107与CDKN2B存在靶向调控关系.结论 过表达HCG18可能通过海绵化miR-107来上调CDKN2B表达,进而抑制PTC细胞增殖、迁移与侵袭.
人类白细胞抗原复合体18、miR-107、周期蛋白依赖激酶抑制因子2B、甲状腺癌、增殖
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R736.1;R73-3(肿瘤学)
金华市科学技术研究公益类项目2021-4-008
2023-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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