miR-155介导PI3K/Akt通路对大鼠发育性髋关节发育不良的作用机制研究
目的 探讨微小RNA-155(miR-155)是否可介导磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路改善大鼠发育性髋关节发育不良(DDH).方法 20只Wistar新生大鼠随机分为空白组、DDH组(后肢襁褓法),每组各10只,RT-qPCR技术检测髋关节软骨中miR-155的相对表达量;将40只Wistar新生大鼠随机分为空白组、DDH组、DDH+miR-155 NC组及DDH+miR-155下调组,每组各10只,其中DDH+miR-155 NC组及DDH+miR-155下调组大鼠分别于尾静脉注射miR-155-NC-LV、miR-155-RNAi-LV各100μL,空白组及模型组大鼠仅注射等量生理盐水,1次/周,共8周.测量股骨头及髋臼大小;番红O-固绿染色观察关节软骨蛋白聚糖分布情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测miR-155、基质金属蛋白酶(MMP)-13和X型胶原蛋白(Collagen X)mRNA相对表达量;免疫蛋白印迹(Western blot)法检测髋关节软骨中MMP-13、Collagen X蛋白相对表达量及PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体S6蛋白激酶1(S6k1)蛋白活性水平.结果 miR-155在DDH大鼠髋关节软骨组织中高表达(P<0.05);与空白组比较,DDH组、DDH+miR-155 NC组及DDH+miR-155下调组大鼠股骨头长径、横径和髋臼长径、横径及髋臼深度值均减小,软骨组织切片可见基质中红染变淡,软骨表层细胞见不同程度缺损,miR-155、MMP-13和Collagen X mRNA及蛋白相对表达量均升高,PI3K、Akt、mTOR及S6k1蛋白活性水平均降低(P<0.05);DDH组与DDH+miR-155 NC组之间差异无统计学意义(P>0.05);与DDH组和DDH+miR-155 NC组比较,DDH+miR-155下调组大鼠股骨头长径、横径和髋臼长径、横径及髋臼深度值均增加,软骨基质中蛋白聚糖红染程度加深,miR-155、MMP-13和Collagen X mRNA及蛋白相对表达量均降低,PI3K、Akt、mTOR及S6k1蛋白活性水平均升高(P<0.05).结论 下调miR-155可减轻DDH大鼠关节软骨组织退化,这可能与miR-155负向调控PI3K/Akt通路激活有关.
微小RNA-155、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路、发育性髋关节发育不良、大鼠
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R361.2;R681(病理学)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目LHGJ20190951
2023-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1353-1358
