简并引物q-PCR法检测新疆喀什地区羊肝组织中细粒棘球绦虫

摘要：

目的 建立检测新疆喀什地区羊肝组织中细粒棘球绦虫的分子生物学方法,提高包虫病的早期诊断水平.方法 对羊肝组织内获取棘球蚴囊,将囊内容物离心沉淀提取DNA,以细粒棘球绦虫线粒体cytochrome b基因为靶基因设计引物进行PCR扩增,引物设计考虑简并碱基.结果 建立的简并引物q-PCR法特异性好,与常见的宿主动物(羊、驴和犬)基因组无交叉扩增现象,与肝内的常见寄生虫(肝片吸虫和莫尼茨绦虫)基因组无交叉扩增.梯度稀释的基因组DNA:10 ng、1 ng、100pg、10pg进行qPCR实验均能得到标准的S型曲线.PCR体系R2=0.984,效率:92.6％,符合qPCR的相关要求.结论 线粒体基因组的cyto-chrome b基因分析是棘球蚴病诊断和分型的有力工具.喀什地区首次应用简并引物q-PCR法检测细粒棘球绦虫,灵敏度高,特异性好,为下一步对该地区进行包虫病分子流行病调查提供了技术支撑.

关键词：细粒棘球蚴、cytochrome b基因、基因型、分子流行病学

所属期刊栏目：43

分类号：R34;R381(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：中山市社会公益科技研究项目2018B1083

在线出版日期：2022-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：46-50