高钙离子诱导人肾小管上皮细胞自噬对炎症因子生成的影响
目的 观察高钙离子诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生细胞自噬对细胞炎症因子单核细胞趋化蛋白(MCP-1)及高迁移率族蛋白1(HMGB1)生成的影响.方法 体外培养HK-2细胞,分别用正常培养液(不含Ca2+溶液)、5 mmol/L Ca2+溶液、10 mmol/L Ca2+溶液进行处理12 h,以及用10 mmol/L Ca2+液各处理0、6、12 h,采用Western blot检测自噬标记蛋白(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值)和自噬相关因子Beclin1的表达水平,实时定量PCR(RT-PCR)方法检测细胞炎症因子HMGB1及MCP-1的表达水平.同时,利用不同浓度的细胞自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-MA)和氯喹(CQ)分别预处理HK-2细胞6 h,随后再用上述3个浓度梯度的Ca2+溶液处理HK-2细胞12 h,采用RT-PCR检测细胞自噬水平对炎症因子HMGB1及MCP-1表达的影响.另外,HK-2细胞分别用4个浓度梯度(0、10、20、30μmol/L)CQ预处理6 h,再用10 mmol/L Ca2+培养液处理12 h,MTT法检测各组细胞的细胞抑制率.结果 与不含Ca2+溶液比较,高Ca2+液处理能显著上调HK-2细胞LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和Beclin 1蛋白的表达水平(P＜0.05);同时,高钙离子刺激能上调HK-2细胞MCP-1、HMGB1的表达(P＜0.05).使用3-MA及CQ预处理能显著下调HK-2细胞MCP-1 mRNA的表达(P＜0.05),但对HMGB1 mRNA的表达无显著影响(P＞0.05).此外,CQ预处理能够改善高钙离子诱导的细胞抑制率.结论 在高钙离子环境下,肾小管上皮细胞MCP-1、HMGB1表达增多,细胞自噬水平上调.抑制细胞自噬能够减少高钙液诱导的MCP-1的表达及改善细胞活力,但对HMGB1的表达无影响.
高钙尿、人肾小管上皮细胞、细胞自噬、MCP-1、HMGB1
40
R364.5;Q25(病理学)
国家自然科学基金资助项目 81660125
2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
483-487
