10.3969/j.issn.1001-9448.2018.10.007
α-烯醇酶对胃癌细胞株MGC-803上皮间质转化的影响
目的 研究α-烯醇酶(α-enolase, ENO1)对MGC-803胃癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的作用.方法 扩增 ENO1 基因编码区序列,构建真核表达载体 pcDNA3.1/ENO1并测序;脂质体转染胃癌细胞,以pcDNA3.1/ENO1 质粒转染细胞为ENO1 组,以空质粒pcDNA3.1 转染细胞为对照组,Real-time PCR和Western Blot分别检测各组ENO1的mRNA及蛋白表达情况;在转染24 h收集两组细胞,Real-time PCR检测并比较EMT特异标志基因E-cadherin、Snail及Vimentin表达水平;合成特异干扰ENO1的siRNA片段,脂质体转染癌细胞,在转染24 h收集干扰组和对照组细胞,Real-time PCR检测EMT特异基因表达水平.结果 Real-time PCR结果显示,ENO1组ENO1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05);Western Blot发现,ENO1组ENO1蛋白相对表达量也高于对照组(P<0.05).结果发现转染24 h后ENO1组E-cadherin、Snail及Vimentin等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义( P>0.05);转染24 h后干扰组E-cadherin、Snail 及 Vimentin 等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义( P >0.05).结论 在胃癌细胞内过表达及干扰ENO1表达,对细胞EMT并无明显作用,ENO1对胃癌细胞功能的影响可能与EMT无关.
胃癌细胞、ENO1基因、上皮间质转化
39
广东省科技发展专项资金项目2016A030313683;东莞市社会科技发展项目2013108101052,2014108101051,2016108101039
2018-08-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1460-1465