C-sis基因对过氧化氢诱导大鼠肝细胞凋亡的抑制作用

摘要：

目的 探讨大鼠C-sis基因对过氧化氢(H2O2)诱导肝细胞凋亡的影响.方法 使用脂质体转染法把重组质粒pcDNA3. 1/C-sis和空载质粒pcDNA3. 1转染进入正常大鼠肝细胞株BRL细胞,转染后的6～8 h用浓度为200 μmol/L的H2O2处理细胞,作用48 h后收获细胞.细胞分为正常对照组、空载质粒组、C-sis质粒组、H2O2组、空载质粒+H2O2组、C-sis质粒+H2O2组.利用荧光定量PCR检测C-sis的mRNA表达;利用Western blot检测C-sis的蛋白表达和Caspase3活性;利用CCK8检测细胞活力;利用TUNEL检测细胞凋亡;利用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期.结果 与正常对照组和空载质粒组相比, C-sis质粒组的C-sis mRNA和蛋白表达水平显著升高(P均< 0.01).与正常对照组相比,H2O2组的细胞活力明显下降(P＜0.01),激活型Caspase3蛋白明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞活力升高(P＜0.01),激活型Caspase3蛋白降低(P＜0.05).TUNEL结果显示,与正常对照组相比,H2O2组的细胞凋亡明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞凋亡明显降低(P＜0.01).流式细胞术结果显示,与正常对照组相比,H2O2组的细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞凋亡明显降低(P＜0.01).各组之间的细胞周期没有明显区别(P＞0.05).结论 C-sis基因能抑制H2O2诱导的肝细胞凋亡,并促进其生长.

关键词：C-sis、过氧化氢、BRL 细胞、凋亡

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81300348;江西省青年科学基金资助项目20151BAB215006;江西省教育厅科学技术研究项目GJJ150259;江西省卫计委科技计划项目20165199

在线出版日期：2018-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：346-349