雌激素受体β干扰质粒对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响及ERK1/2信号通路的作用

摘要：

目的 探讨雌激素受体 β(ERβ)干扰质粒对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响,以及ERK1/2信号通路在其中的作用.方法 针对ERβ 特定靶定位置,构建干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-shERβ(shERβ),利用Lipofectemine2000作为载体将shERβ 转染PC3细胞,采用G418筛选稳定低表达ERβ 的PC3细胞.Real-time PCR及Western blot检测ERβ 的表达.实验分为空白对照组、阴性对照组、shERβ 组,将3组细胞注射在裸鼠皮下建立移植瘤模型,空白对照组未加入任何处理因素;阴性对照组转染空质粒psilencer-2.1-U6-neo;shERβ组转染重组质粒psilencer-2.1-U6-neo-shERβ.绘制肿瘤生长曲线和称取瘤重;应用免疫组织化学检测肿瘤组织ERβ 的表达及ERK1/2活化;应用Western blot检测肿瘤组织VEGF的表达.结果 测序比对分析表明成功完成了干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-shERβ 的构建,Real-time PCR及Western blot结果显示成功转染并筛选出稳定低表达ERβ 的PC3细胞.体内成功建立PC3细胞裸鼠移植瘤模型,移植瘤生长曲线显示shERβ 组移植瘤生长速度明显快于其他两组.免疫组化结果显示ERβ阳性表达shERβ 组最低;ERK1/2阳性表达在3组之间无明显差异,p-ERK1/2阳性表达shERβ 组最高(P<0.05).Western blot结果显示shERβ 组VEGF蛋白表达明显高于其他两组(P<0.05).结论 ERβ 可通过抑制ERK1/2信号通路活化来抑制前列腺癌PC3细胞恶性生物学行为.

关键词：前列腺癌、雌激素受体β、RNA干扰、生物学行为

所属期刊栏目：38

分类号：R73;R85

在线出版日期：2017-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2768-2772