草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞紧密连接损伤与TRPV5变化的调节机制

摘要：

目的 探讨草酸钙晶体黏附肾小管上皮引起紧密连接(TJs)损伤与TRPV5变化的调节机制.方法 利用一水草酸钙晶体(COM)暴露犬肾小管上皮细胞(MDCK)及TRPV5稳定过表达HEK-293细胞,2 mmol/L EGTA处理构建细胞TJs损伤模型;采用Western blot、荧光免疫、偏光显微镜等手段,分别检测TJs主要结构蛋白、Na+-K+-ATPase、TRPV5、晶体黏附量等指标,评估草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞TJs损伤及TRPV5表达的变化.结果 COM呈下调MDCK细胞TJs蛋白Occludin和ZO-1表达水平(P<0.01).TJs损害后,COM黏附增加(P<0.05);Na+-K+-ATPase介导TJs修复,在1 min时表达最强,随着TJs修复完成而逐步减弱,晶体黏附力也逐渐减弱(P<0.01).COM与TRPV5稳转HEK-293细胞株共培养,下调TRPV5总蛋白及膜蛋白表达水平(P<0.01).结论 草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞之间的TJs受损,促进草酸钙晶体黏附;细胞极性破坏,TRPV5膜蛋白转运失调,最终引起TRPV5膜蛋白表达减少.尿钙增加,负反馈激发Na+-K+-ATPase表达使TJs进入修复环节;随着TJs的自我修复,草酸钙晶体黏附减少.

关键词：草酸钙晶体、肾小管上皮、紧密连接、TRPV5

所属期刊栏目：38

分类号：O62;R36

资助基金：广东省优秀青年教师培养计划项目B158027;广州市科技计划项目201610010169;广州市市属高校科研项目1201620038

在线出版日期：2017-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2109-2113