乳腺癌NFAT对tmTNF-α基因转录的调节作用

摘要：

目的 研究乳腺癌NFAT对跨膜型肿瘤坏死因子α(tmTNF-α)基因转录的调节作用.方法 构建质粒,FACS检测内源性tmTNF-α的表达,Westemblot检测内源性NFAT的活化;采用ChIP法对人的乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7分析NFAT1对tmTNF-α启动子的结合;给予低表达tmTNF-α的乳腺癌细胞系MCF-7 NFAT的刺激剂PMA/iono以促进其入核活化;给予高表达tmTNF-α的乳腺癌细胞系MDA-MB-231NFAT的抑制剂VIVIT以阻止其入核.结果 人乳腺癌细胞MDA-MB-231高表达tmTNF-α(89.2％),而MCF-7几乎不表达tmTNF-α(1.0％);高表达tmTNF-α的MDA-MB-231细胞中不仅存在细胞浆中表达的非活化蛋白pNFAT1,在细胞核中也检测到其活化形式蛋白NFAT1;而在MCF-7中没有检测到NFAT1活化蛋白的表达;根据特异性启动子引物,MDA-MB-231的染色质样品可检测到相应的目的片段,说明该细胞系中存在NFAT1对tmTNF-α启动子的结合.而在MCF-7中没有出现可看到的目的片段.Western blot检测到tmTNF-α的表达显著增加,提示在乳腺癌细胞MCF-7,PMA/iono可促进NFAT活化,通过对转录活性的调节促进tmTNF--α的表达;给予高表达tmTNF-α的乳腺癌细胞系MDA-MB-231NFAT的抑制剂VIVIT以阻止其入核,West-ern blot检测到tmTNF-α的表达明显减少.结论 可通过抑制NFAT1来影响tmTNF-α的表达.

关键词：跨膜型TNF-α、乳腺癌、抗肿瘤药物、NFAT、Homer2

所属期刊栏目：37

分类号：R73;R28

在线出版日期：2017-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2868-2872