成纤维细胞激活蛋白及其突变体真核表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的：构建并鉴定人成纤维细胞激活蛋白（ FAPα）真核表达质粒pcDNA－wFAPα（野生型FAPα）、pcDNA－tFAPα（胞外段FAPα）和pcDNA－mFAPα（缺失624～704位氨基酸的突变型FAPα）。方法以口腔癌组织总RNA为模板，采用RT－PCR方法扩增wFAPαcDNA基因片段，连接至真核表达质粒pcDNA3．1（＋）获得重组pcDNA－wFAPα质粒。以重组 pcDNA －wFAPα为模板，扩增 tFAPα基因片段；用 overlap PCR 技术，获得mFAPα基因；分别连接至pcDNA3．1（＋）获得重组pcDNA－tFAPα和pcDNA－mFAPα质粒。结果酶切鉴定和测序验证皆显示pcDNA－wFAPα、pcDNA－tFAPα和pcDNA－mFAPα为正确重组质粒。结论成功构建人野生型FAPα（ wFAPα）、胞外段FAPα（ tFAPα）和突变型FAPα（ mFAPα）真核表达质粒，为进一步研究FAPα在口腔鳞癌发病过程中的分子机制奠定基础。

关键词：成纤维细胞激活蛋白、真核表达载体、pcDNA3.1(+)

所属期刊栏目：37

分类号：R32;R6

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号81472536;广东省科技计划项目编号2012B031800139，2014A020212440

在线出版日期：2016-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1909-1911