ERG 基因3′端非翻译区荧光素酶报告载体的构建及其活性
目的：构建人ERG基因3′端非翻译区（3′UTR）双荧光素酶报告载体，为研究ERG基因的转录后调控提供实验基础。方法以基因组DNA为模板PCR扩增ERG的3′UTR序列，并连接到psiCHECK2双荧光素酶报告载体的多克隆位点，测序鉴定psiCHECK2－ERG载体构建是否成功。通过生物信息学预测ERG 3′UTR具有miR－145－5p的结合靶点。通过共转染miR－145－5p模拟物和psiCHECK2－ERG载体，检测荧光素酶的活性，以共转染miR－145－5p模拟物对照和psiCHECK2－ERG载体作为参照。结果构建了含有ERG 3′UTR序列的双荧光素酶报告系统，酶切电泳和基因测序证实序列与目标一致。 miR－145－5p模拟物和报告质粒共转染者荧光素酶活性明显下降（28.39％，P＜0.05）。结论含有ERG 3′UTR的双荧光素酶报告载体构建成功。初步鉴定miR－145－5p作用ERG基因3′UTR，对ERG发挥转录后水平调控作用。
ERG、微小RNA、双荧光素酶报告载体、3′端非编码区
R3 ;R73
广东省第三批重大科技专项编号2011A080300002;广东省部产学研结合引导项目编号2011B090400526;广州市科技和信息化局科技支撑计划项目编号2010J－E141
2015-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
3097-3100
