米诺地尔对转化生长因子β1诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖的影响
目的:采用转化生长因子β1( TGF-β1)诱导大鼠肺成纤维细胞,予不同浓度的米诺地尔进行干预,观察其对大鼠肺成纤维细胞增殖及α-平滑肌肌动蛋白(α-SAM)、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法以组织贴块法分离培养大鼠肺成纤维细胞,将纯化至第4代的肺成纤维细胞分为5组,对照组:正常的成纤维细胞,未作处理,模型组:予TGF-β110 ng/mL孵育24 h;M1、M2、M3组:在模型组基础上分别给予200、400、800μmol/L米诺地尔共同孵育细胞。采用MTT法观察各组12、24、48 h细胞增殖情况,采用real -time PCR检测各组细胞α-SAM、Ⅰ型胶原mRNA的表达情况。结果(1)干预组较模型组细胞体积缩小、形态不规则、生长速度减慢。(2)米诺地尔对大鼠肺成纤维细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),半数抑制率(IC50)为:0.997 mmol/L。(3)模型组的α-SAM及I型胶原蛋白mRNA的表达均较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)中剂量干预组48h及高剂量干预组12、24、48 h所测α-SAM mRNA的表达与模型组对比,差异有统计学意义( P<0.05);24及48 h时,低、高剂量干预组所测α-SAM mRNA的表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)中剂量干预组48 h及高剂量干预组12、24、48 h所测I型胶原mRNA的表达与模型组对比,差异有统计学意义( P<0.05);不同时间点,低、高剂量干预组所测I型胶原mRNA的表达差异有统计学意义( P<0.05)。结论米诺地尔能抑制TGF-β1诱导大鼠肺成纤维细胞的增殖能力,抑制α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA的表达。
米诺地尔、肺纤维化、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白
R73;R57
国家自然科学基金资助项目编号81460014;贵州省科教青年英才培养工程项目编号黔省专合字2012188号;贵州省留学人员科技活动项目编号黔人社厅函[2014]456号-10
2015-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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