L-ficolin(P35)与HCV和HBV感染的相关性
目的 探讨L-ficolin与丙型肝炎(丙肝)病毒( HCV)、乙型肝炎(乙肝)病毒( HBV)感染的相关性,为丙肝、乙肝的免疫治疗探索新的途径. 方法 采用ELISA检测103例丙肝、126例乙肝患者血清中的L-ficolin的含量,并与126例正常人血清中的L-ficolin含量进行比较. 同时,用荧光染料FITC(或PE)标记L-ficolin的抗体行流式细胞术( FCM)检测丙肝、乙肝患者外周血单个核细胞( PBMC)和DC细胞内L-ficolin的表达. 根据以上两个实验的结果将HCV的各个基因成分包括NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a、NS5b、E1、E2、Core及pblue-HBV的真核表达质粒,与L-ficolin构建在pGL2载体上的启动子共转染到HepG2细胞,48 h后收获细胞,用Luciferase荧光报告基因试剂盒检测细胞荧光,探讨是病毒的何种成分与L-ficolin表达相关. 结果 夹心ELISA法检测到丙肝患者血清中的L-ficolin表达水平明显高于正常人( P<0.05) ,而乙肝患者血清中的L-ficolin表达水平却比正常人低(P<0.05). FCM检测丙、乙肝患者的PBMC也得到同样的结果,且进一步发现L-ficolin可能主要表达在DC细胞中. 同时用HCV/HBV感染纯化的人DC细胞,可见HCV感染的DC细胞中的L-ficolin升高,而HBV感染的DC细胞中的L-ficolin降低,进一步验证上述的实验结果. 用Luciferase荧光报告基因试剂盒检测共转染病毒各种基因成分与L-ficolin启动子得到的荧光值表明,HCV全基因组以及部分基因如Core、NS4a、NS4b等能使L-ficolin启动子荧光表达上升,而HBV复制子则使L-ficolin启动子荧光表达下降. 免疫组化结果显示正常人肝组织表达L-ficolin蛋白,但是发生乙肝及丙肝感染癌变的组织中L-ficolin蛋白表达均下降甚至不表达. 结论L-ficolin在丙肝、乙肝患者体内表达异于正常人,提示L-ficolin在对抗HCV、HBV感染有一定作用. HCV能够激活L-ficolin的启动子,而HBV可能抑制L-ficolin启动子的激活. 同时肝组织是产生L-ficolin蛋白的场所,当肝组织癌变,则L-ficolin蛋白表达发生异常. 提示L-ficolin蛋白与肝组织癌变相关.
L-ficolin、丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、启动子
36
R51;R47
2015-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
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