小分子化合物对小鼠肝细胞分化为胰岛素分泌细胞的体外诱导作用

摘要：

目的：分离原代小鼠肝细胞，在小分子化合物作用下将其诱导分化为胰岛素分泌细胞（ IPCs ）。方法采用肝脏组织直接剪碎的方法分离、培养小鼠肝细胞，并进行肝细胞糖原染色鉴定。随后将肝细胞分别用不同的诱导剂5－氮杂胞苷（5－AZA）、曲古霉素A（TSA）、维甲酸（RA）、胰岛素－转铁蛋白－硒（ITS）、尼克酰胺（ NA ）及不同糖浓度的培养液进行诱导，同时以不含诱导剂的培养液培养肝细胞作为阴性对照。结果原代肝细胞在5－AZA、TSA的作用下去分化，RT－qPCR显示成熟肝细胞表面标志物白蛋白明显下降，出现巢蛋白（ nestin）表达阳性细胞，进一步在含RA、ITS的低糖培养液培养7 d及含NA的低糖培养液培养7 d，分别获得在基因及蛋白水平都表达的Pdx1及胰岛素阳性细胞。结论小分子化合物（5－AZA、TSA、RA、ITS、NA）及依次使用高浓度和低浓度葡萄糖可以在短时期内（17 d）将肝细胞诱导为胰腺前体细胞（Pdx1阳性细胞），并进一步分化为IPCs。

关键词：肝细胞、小分子化合物、胰岛素分泌细胞、糖尿病

分类号：R97;R91

资助基金：江西省自然科学基金资助项目编号20144BAB2050007

在线出版日期：2015-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2128-2131,2132