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人参皂苷Rb1对低氧加无血清培养诱导的大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响

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目的:探讨人参皂苷Rb1对低氧/无血清培养诱导的大鼠骨髓间充质干细胞( rBMSCs)凋亡的作用。方法 MTT法检测浓度范围在0.1~1000μg/L的人参皂苷Rb1对rBMSCs增殖的影响。将细胞培养液更换为低氧预处理的不含血清的培养液,置1%O2、5%CO2、37℃三气培养箱中培养24 h建立细胞凋亡实验模型。实验分为C组、H/SD组和Rb1-L组、Rb1-M组、Rb1-H组。 C组和H/SD组分别为常氧和低氧血清剥夺处理,不加Rb1,Rb1-L组、Rb-M组、Rb1-H组在H/SD处理的同时,培养液中依次加10、100、1000μg/L Rb1。 Annexin V-FITC/PI染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡情况,罗丹明123+Hoechst 33342染色观察线粒体膜电位改变,分光光度法检测Caspase-3酶活力,qRT-PCR检测Bcl-2家族基因表达水平。结果 Rb1浓度范围在10~1000μg/L有促细胞增殖作用。与C组比较,H/SD组细胞凋亡率、Caspase-3酶活性均升高,线粒体膜电位明显降低, Bcl-2 mRNA表达水平下降,Bax mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01),Bcl-2/Bax比值为0.32。与H/SD组比较,Rb1-L、Rb1-M和Rb1-H组细胞凋亡率及Caspase-3酶活力均降低,线粒体膜电位有不同程度恢复,Bcl-2 mRNA表达水平升高,Bax mRNA表达水平降低, Bcl-2/Bax比值均升高,差异有统计学意义( P<0.05,P<0.01)。各项指标在Rb1各组组间差异无统计学意义(P>0.05),但反应强度H组>M组>L组。结论人参皂苷Rb1对低氧加无血清培养诱导的rBMSCs 凋亡有保护作用,其浓度以1 mg/L 为最佳。

人参皂苷Rb1、骨髓间充质干细胞、细胞凋亡、低氧/血清剥夺、大鼠

国家级大学生创新创业训练计划项目编号201310571007;广东省科技计划项目编号2013B21800268;广东省大学生创新创业训练计划项目编号1057113013;广东医学院大学生创新实验项目编号ZYDS004

2015-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

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