家蝇Defensin基因原核表达条件的优化及其抑菌活性

摘要：

目的 优化家蝇Defensin基因原核表达条件,并初步研究其抑菌活性.方法 Defensin基因成熟肽被克隆入pGEX-4T-1原核表达载体中,构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,并转化宿主菌后诱导表达,表达过程中对菌液起始浓度、IPTG浓度、诱导温度和时间进行优化.采用亲和层析法分离纯化融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的 蛋白的表达情况和分子量.用凝血酶切除谷胱甘肽标签,并通过体外抑菌实验检测其抗菌活性.结果 成功构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,目的 基因能够在大肠埃希菌内高效表达,分子量为4 kD,与预期值一致,表达量约达40%.抑菌实验显示其对大肠埃希菌K12D31生长有一定的抑制作用.结论 本实验为家蝇Defensin基因功能的深入研究奠定了工作基础.

关键词：抗菌肽、表达、活性、Defensin

所属期刊栏目：34

分类号：TQ9;TS2

在线出版日期：2013-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2458-2461