miRNA沉默VCP对骨肉瘤细胞U2-OS增殖和迁移的影响

摘要：

目的 探讨沉默VCP基因对人骨肉瘤细胞系增殖、迁移的影响.方法 构建靶向VCP 基因的重组质粒载体(X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1)和阴性对照载体(Negative),测序鉴定;X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1分别转染人骨肉瘤细胞系U2-OS(阳性干扰组:X135-1-2组、X135-2-1组、X135-3-1组),Negative质粒转染为阴性对照组,未转染细胞为空白对照组.RT-PCR检测VCP mRNA的表达水平,Western blot测定VCP的蛋白表达水平,MTT检测细胞的增殖情况,Transwell migration实验检测细胞迁移力.结果 转染后48 h,与空白对照组和阴性对照组比较,X135-1-2、X135-2-1和X135-3-1组VCP mRNA和蛋白的表达均明显降低,尤以X135-3-1组更为显著[VCP mRNA和蛋白表达抑制效率分别为(81.4±3.0)%和(83.3±6.0)%];各阳性干扰组细胞的增殖能力均被明显抑制,以X135-3-1组更为显著(P<0.05);各阳性干扰组细胞的迁移能力明显下降,以X135-3-1组更为显著(P<0.05).结论 沉默VCP能有效抑制人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞的增殖和迁移,VCP可能是骨肉瘤治疗的分子靶点.

关键词：基因沉默、VCP、骨肉瘤、增殖、迁移

所属期刊栏目：34

分类号：R73;R96

资助基金：江西省教育厅科学技术研究项目GJJ11316

在线出版日期：2013-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1481-1485