药物诱导与耐药基因转染两种方法建立的人食管癌顺铂耐药细胞系的比较

摘要：

目的 比较药物诱导和耐药基因转染两种方法 所建立的人食管癌顺铂耐药细胞系的不同特点.方法 顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9个月建立食管癌耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时采用脂质体转染法将人野生型DNA聚合酶β(polβ)的重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入食管癌细胞Ec9706,经G418筛选得到稳定转染细胞系Ec9706-AC3.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.绘制生长曲线,计算群体倍增时间.RT-PCR方法 检测细胞中polβ mRNA的表达水平,MTT法测细胞对顺铂的敏感性,并观察冻存复苏、撤药培养对耐药性的影响.结果 两种方法 所获耐药细胞与亲本细胞相比形态无明显变化,polβ mRNA表达均增加.Ec9706/cDDP耐药指数为15.70±1.16,冻存复苏对耐药指数影响不大,而撤药培养可使耐药性降低,细胞群体倍增时间延长;Ec9706-AC3细胞耐药指数为1.78±0.67,不受冻存复苏、撤药培养的影响,细胞群体倍增时间不变.结论 用不同方法 成功建立两种人食管癌顺铂耐药细胞,不同方法 获得的耐药细胞生物学特性有所不同.

关键词：DNA聚合酶β、食管癌细胞、耐药细胞、转染

所属期刊栏目：33

分类号：R73;R97

在线出版日期：2012-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：726-729