神经生长因子对PC12细胞内源性FoxO3a亚细胞分布的影响及其作用机制

摘要：

目的 研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对内源性FoxO3a转录因子亚细胞定位的影响及其作用机制.方法 PC12细胞分为血清剥夺组、K252a处理组、NGF处理组及K252a+NGF处理组,通过免疫细胞化学(immunocytochemistry)研究给予NGF及K252a处理后,FoxO3a的亚细胞定位情况.应用表达FoxO3a-GFP融合蛋白的质粒,转染PC12细胞,经NGF及K252a处理,观察FoxO3a-GFP的亚细胞定位.通过蛋白免疫印迹(Western blot)研究NGF及K252a处理对TrkA磷酸化水平的影响;应用PI3K、Akt及ERK信号通路抑制剂研究NGF及K252a对TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a信号蛋白磷酸化的影响.结果 PC12细胞剥夺血清及剥夺血清加K252a后,内源性FoxO3a主要分布于细胞核内;给予NGF处理后,内源性FoxO3a则外排至细胞核外;NGF+K252a处理后,K252a则可以阻断NGF的作用,FoxO3a位于细胞核内;过表达外源性GFP-FoxO3a质粒的结果 与此一致,Western blot结果 显示给予NGF处理后,NGF受体TrkA及TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a的磷酸化水平显著上升,K252a则阻断了这一作用.同时,PI3K的抑制剂LY294002及Akt的抑制剂Akt inhibitor Ⅷ也阻断了NGF诱导的FoxO3a的磷酸化,但MAPK信号通路的抑制剂PD98059则没有这一作用.结论 NGF可促进内源性FoxO3a磷酸化并转位出核,NGF的作用与激活TrkA受体及其下游激酶有关.

关键词：FoxO3a、磷酸化、核转位、神经生长因子

所属期刊栏目：33

分类号：R73;R5

资助基金：国家自然科学基金资助项目30670652、30711120565、30970935;广东省科技计划项目2009B060700008;国家外专局外国文教专家重点项目36000-1181102;广东省外国专家局资助项目36000-5220001

在线出版日期：2012-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：575-578