刚地弓形虫His-TgPP2C融合蛋白的表达与纯化

摘要：

目的 构建His-TgPP2C重组质粒,在大肠杆菌E.coil BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定.方法 利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA3-TgPP2C为模板,扩增出全长的TgPP2C基因,将所得的PCR产物插入带有His标签的原核表达载体pBAD-His中,得到重组质粒.经XhoⅠ、HindⅢ双酶切及测序鉴定正确后,转化至大肠杆菌E.coli BL21,通过异丙基-β-硫代半乳糖苷诱导表达His-TgPP2C融合蛋白,最后经Ni-NTA柱亲和层析纯化融合蛋白以及Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白.结果 得到构建好的His-PP2C质粒及纯化的目的 融合蛋白His-TgPP2C.结论 成功构建pBAD-His-TgPP2C原核表达载体,表达及纯化了His-PP2C融合蛋白,为深入研究TgPP2C蛋白在刚地弓形虫疾病发生发展过程中的作用奠定基础.

关键词：His-PP2C、融合蛋白、表达、纯化、刚地弓形虫

所属期刊栏目：33

分类号：TP3;R53

资助基金：广东省自然科学基金资助项目9151065004000005;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目21609705,21609317

在线出版日期：2012-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：177-179